学有机的,怎样做才能把柱子过好?

提问时间:2021/2/25 15:43:31
学有机的,怎样做才能把柱子过好?

2条回复:

匿名
2021/2/25 15:43:55
 一般来说,爬板是走柱子的基础。但是,由于板上的硅胶和柱子里的硅胶有些差别,而且板的分离效率与远远高于柱子的分离效率,因此分不开时正常的。 尽量将柱子装运均,装结实,用洗脱液实现平衡柱子,效果会好一些。 装柱子时,下边用真空泵抽气,多次少量加入硅胶,不断用胶皮抽打。 进样时,尽量将样品平铺。 加入洗脱液时,动作要缓。 最后,可长时减下洗脱梯度。
匿名
2021/2/25 15:45:57

湿法装柱, 第一要选溶剂,通常是洗脱剂或者洗脱剂中的小极性单一溶剂。

第二要搅拌均匀,就是将柱层析硅胶用上述溶剂浸泡后搅拌至流动性很好且没有气泡为止。

第三是倒至柱子中,最好一次倒入,不要分批;可以在柱子上端接一段溶剂球,把所有浸泡好的硅胶(要搅拌起来)一次倒入。

第四是敲柱子,我通常都是用一对20号橡胶塞,从下至上缓慢轻敲,敲两个来回后将柱子转45度后再重复敲,如此敲三圈,观察硅胶沉降基本完全即可。敲的时候,柱子中的溶剂可以有很多,此时可打开下面的节门,边流边敲;也可以先放溶剂至硅胶表面,再敲使得硅胶沉降、溶剂出来。这步是关键步骤,而且硅胶表面溶剂不能干。 如此,基本装好啦。



 

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