[摘要] 目的:制备氧氟沙星锌,并进行体外抑菌试验观察。方法:采用氨水法、氢氧化钠 法、碳酸钠法制备氧氟沙星锌,并与氧氟沙星、磺胺嘧啶锌进行体外抑菌试验比较。结果:碳酸钠法、氨水法均比氢氧化钠法好,氧氟沙星锌对3种质控菌的抑菌作用 与氧氟沙星基本相同,明显高于磺胺嘧啶锌。结论:该药物可用于临床。
[关键词] 氧氟沙星锌;制备;体外抑菌
氧氟沙星(ofloxacin)是第3代喹诺酮类广谱抗菌药物,抗菌谱广,且不易产生耐药性[1]。锌是机体必需的微量元素之一,参与核酸、蛋白质、胶原的合成,刺激纤维 母细胞分裂、繁殖和再生,提高表皮细胞的分裂生长,从而加速创伤修复[2]。为此,我们将氧氟沙星制成锌盐,作为一种新型的烧伤局部治疗药物。我们参考磺胺嘧啶锌的 制备方法[3]进行了氧氟沙星锌合成方法的研究,并进行了体外抑菌试验,现报道如下。
1 仪器与试药
Du-50型分光光度计(beckman);氧氟沙星原料药(江苏昆山制药总厂);其余 试剂均为分析纯;标准菌株:金黄色葡萄球菌(ATCC-25923)、大肠杆菌(ATCC-25922) 、铜绿假单胞菌(ATCC-27853),由中国药品生物制品检定所提供。
2 氧氟沙星锌的制备
2.1 制备方法[3] 取氧氟沙星5.5 g(约0.015 mol ),加入适量蒸馏水,置水浴搅拌成混悬液,缓慢滴加适量的10%氨水或1 mol.L-1 的氢氧化钠,1 mol.L-1碳酸钠溶液。待氧氟沙星完全溶解后(pH 8~10),缓慢滴 入10%硫酸锌溶液23 ml(约0.008 mol),加毕后继续搅拌1 h,使反应完全。抽滤,滤饼用蒸馏水洗至无SO42-,70℃~80℃干燥即得。
2.2 3种制备方法的比较 采用氨水法、氢氧化钠法、碳酸钠法,各 制备6批,各种方法的产率及质量见表1。
表 1 3种方法的产率和质量比较(n=6)
制备方法
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产率/%
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含量/%
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颜色性状
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氢氧化钠法
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92.5±0.7
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89.6±1.0
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淡黄色结晶性粉末
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碳酸钠法
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97.0±0.6
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98.8±1.3
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淡黄色结晶性粉末
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氨水法
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96.7±0.4
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99.1±1.2
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淡黄色结晶性粉末
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3 氧氟沙星锌的性状
白色或浅黄色的粉末,无臭,味微苦,在空气中遇光色渐变深,不溶于水,不溶于乙醚 、乙醇等有机溶媒,微溶于二甲基甲酰胺,在酸碱中易溶,同时分解。
4 氧氟沙星锌的鉴别及含量测定
4.1 鉴别
4.1.1 取本品约50 mg,置干燥试管中,加入丙二酸约 30 mg与 醋酐0.5 ml,置水浴加热5~10 min,应呈红棕色[4]。
4.1.2 取本品约0.1 g,加稀盐酸少许溶解,加亚铁氰化钾试液即产生白色沉淀[5]。
4.1.3 紫外吸收光谱 取本品加0.1 mol.L-1盐酸溶液制成 每1 ml含10 μg的溶液,照紫外分光光度法(中国药典1995年版二部附录ⅣA)测定,在293 n m 的波长处有最大吸收[4],同时作氧氟沙星紫外吸收图谱进行对照,最大吸收 峰应一致。
4.2 含量测定 精密称取本品约1 g,加稀盐酸和蒸馏水各5 ml,置水浴加热溶 解,放冷。加0.025%甲基红乙醇溶液1滴,滴加氨试液至溶液显黄色,再加氨-氯化 铵缓冲液(pH 10.0)5 ml,络黑T指示剂少许。用乙二胺四乙酸二钠(0.05 mol.L-1)滴定至溶液由紫色变为蓝色即得。每1ml乙二胺四乙酸二钠(0.05 mol.L-1)相当于39.31 mg的(C18H18FN3O4)2Zn(含氧氟 沙星锌应不少于98.5%[6])。
5 体外抑菌试验
5.1 含药培养基的制备 磺胺嘧啶锌、氧氟沙星、氧氟沙星锌碾成细粉 ,并通过6号筛。分别配制成100,50,25,10,5,2,1,0.5,0.25,0.125,0.062 5,0.03 μg.ml-1的含药普通琼脂培养基,同时配制不含药物的空白培养基。 由于药物均耐热,可将配制的培养基同时高压灭菌备用。
5.2 菌液制备 按常规制备相当1 mg.ml-1菌悬液。
5.3 实验方法 在无菌条件下,分别将备用的含药培养基倾入平板,冷 后, 用白金环分别取质控菌采用平板划线法接种于各含药培养基,置37℃培养箱中培养18 ~24 h,观察结果见表2
表 2 3种质控菌对氧氟沙星锌及对照药的MIC值(μg.ml-1)。
药 品
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金黄色葡萄球菌
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大肠杆菌
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铜绿假单胞菌
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氧氟沙星锌
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0.5
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0. 0625
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2
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氧氟沙星
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0.5
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0.0625
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2
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磺胺嘧啶锌
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50
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50
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100
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6 讨论
氧氟沙星锌的3种制备方法比较表明,氢氧化钠法产率及产品纯度均较差,可能因氢氧化钠的碱性较强,加入硫酸锌后易生成氢氧化锌,不易除去,从而影响产 品质量。氧氟沙星的酸性较弱,成盐温度以80℃~90℃为宜,因此制备过程应在水浴中进行 ;同时成盐时碱性不宜太强,pH8~9时产品的产量和纯度均较高,这是影响产品质量的关键。
氧氟沙星与锌结合,在酸性或碱性条件下又可分解为氧氟沙星及锌离子, 因 此可根据各自理化特性用作鉴别反应。
体外抑菌试验表明,氧氟沙星锌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、 铜绿假单胞 菌均具显著的抑菌作用,明显高于磺胺嘧啶锌。临床通过对50例深Ⅱ度烧伤创面的治疗 结果 比较可知,应用1%氧氟沙星锌软膏的创面愈合时间为(12.6±4.2) d, 对照 组使 用1%磺胺嘧啶锌软膏创面愈合时间为(17.3±3.6) d,经t值检验,差异有非 常显著性,取得了满意的临床效果。