做PCR的血液标本如何制作

2021/2/23 14:54:15  作者:郭敏


 1.静脉取血2ml,加入含肝素溶液(10~50u/m1血样本)的试管中,混匀,使血液抗

凝。用pH7.2 Hanks液将抗凝血稀释1倍。
2.吸取2ml淋巴细胞分层液置于刻度离心管中,然后将离心管倾斜45O角,用毛细滴管将稀释的全血沿管壁缓慢加至分离液上面,应注意保持两者界面清晰。
3.在18℃~20℃下,用水平离心机以2000r/min离心20min。离心后细胞分布如图。
 4.用毛细吸管轻轻插到混浊带,沿管壁轻轻吸出此层细胞,移入另一支离心管中。即要吸取所有单个核细胞,又要避免吸取过多的分层液或血浆,以免混入其他细胞成分。
5.用Hanks液洗涤细胞3次。第一次2000r/min ,10 min;第2~3 次1500r/min ,10 min,可去掉大部分混杂的血小板。
6.将沉淀细胞悬于培养基中备用。
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