可在母种试管灌入无菌液体石蜡，注入量以浸没斜面上方1厘米左右为宜，使菌丝与空气隔绝，降低活力容。然后棉塞处包扎薄膜，棉塞向上直立放于干燥器中（室温）或4℃的冰箱中保藏，一般可以保藏1～2年。
化学纯的液体石蜡：在121℃下高温灭菌30分钟，再将液体石蜡在160℃烘箱中保温1～2小时，蒸发掉液体石蜡中的水分。或将高压灭菌后的液体石蜡放置在40～60℃温箱中，使灭菌后的液体石蜡层由乳白色变成无色透明。在无菌条件下，将灭菌除水的液体石蜡用无菌吸管罐到长满菌丝的斜面试管中，液体石蜡要高出斜面顶端1.0厘米左右，然后用无菌硅胶塞塞好，直立地放在试管架上或罐头瓶中，置于冰箱或室温中保藏。液体石蜡灌注过多，移种时不方便；过少则容易干涸。在保藏中，如液体石蜡减少，斜面露出时，应及时以无菌操作方式补充液体石蜡。
从液蜡保藏中移出菌种时，可不必倒出液蜡，只需用接种铲从斜面上铲取一小块菌丝块，取出的菌丝块因沾有液蜡，菌丝生长势弱，需再移转新试管1～2次后，才能恢复正常生长。移接时应避免与火焰接触，以免液蜡燃烧。移接后，原保藏菌种仍可重新封口保藏。