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生化试剂常见问题

2024/8/9 13:51:11  作者:索莱宝


 常量法和微量法试剂盒能否通用?

同一指标的常量法与微量法试剂盒不可以通用,因为两者测定体系不同。如果用户自行改变体系,公司不能保证测定质量。
比色皿有哪些规格?
(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,常量法试剂盒都是选用1mL体系,只能用1mL比色皿,不可以用更大体积的比色皿, 否则试剂量不够,无法正常比色。如果用户需要,自行购买公司的1mL比色皿。 (2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,微量法试剂盒都是选用0.25mL比色皿。如果用户需要,自行购买公司的0.25mL 比色皿。一般客户都选择使用酶标仪(需要自备酶标板)。 (3)紫外波长检测需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。 (4)不同规格的比色皿,其外观大小是一致的,都是1cm光径(也有0.5cm光径的比色皿,不常见,也可以用,但是计算 时要注意修改计算公式),其内容积差异在于壁的厚度。
UV板和普通酶标板有何区别?
(1)微量法一般使用酶标板,当检测波长≥380nm时,用一般的酶标板即可,价格便宜,一次性使用当然也可以用UV板代替, 只是有些浪费。当检测波长<380nm时,须选用区别于一般酶标板的UV酶标板。价格比普通的酶标板贵,但可用洗板机清洗, 重复利用。货号YA0602 96孔UV紫外检测酶标板(未灭菌) (2)最终测定的反应液为有机试剂时(乙醚、丙酮、乙酰乙酯、四氢呋喃、甲苯、氯仿等有机试剂),避免使用聚苯乙烯材质的96孔板。
为什么有些试剂盒不提供标准品?
(1)这个根据最后酶活定义来决定的,能提供的尽量提供,有些酶活测定的试剂盒,这种酶本身就很难获得。 (2)有些检测对象本身就无法购买到标准品。
试剂盒应该在多长时间内用完?
(1)为了保证测定质量,试剂盒开封后一般应该在一个月内用完。 (2)用户样品量大时,可以一次订购,分批生产和发货。 (3)特别值得注意的是,出于试剂稳定性考虑,说明书特别标明现配现用的试剂,配制后应该短时间内用完(如2小时),绝对不可以过夜。 (4)为了用户方便,公司通常分装成几个试剂瓶中,用户可以根据实际测定需要,进行配制。
按照说明书冷藏后出现沉淀的试剂还可以用吗?
可以。但是应该在常温中充分溶解后再用,以免试剂浓度变小,造成测定不可靠。
试剂变色后还可以用吗?
不可以。建议用户注意避光保存,使用前一定要观察试剂颜色是否正常。
可以改变说明书中加试剂顺序吗?
不可以,否则可能造成反应不能正常进行,导致测定失败。强烈建议加完试剂后立即混匀。
加完试剂后是如何振荡混匀的?
使用分光光度计的用户,可以将反应液加在离心管里,通过手动混匀或用涡旋振荡器混匀后马上转移 到比色皿中检测,也可以将试剂放在比色皿中,迅速换成0.2ml的移液枪混匀。使用酶标仪的用户,可以 将酶标仪在测定开始前设置一个5秒钟的振荡程序。
为什么吸光度特别高?
(1)现在分光光度计或者酶标仪,允许测定的吸光度有一定的范围。 (2)吸光度特别高,导致吸光度变化不再符合朗伯比尔定律,同时灵敏度也会降低。 (3)吸光度特别高,可能因为样品提取液在该波长下有其它强烈吸收的物质,添加的底物浓度高, 紫外波长下用的玻璃比色皿,或者普通酶标板,比色皿脏,者比色皿不透光一面对着光源等。
试剂盒中-20度保存的干粉溶解后如何保存?
建议溶解后分装冻存,防止反复冻融。试剂盒开封后建议2周内用完。
标签上写着放4度保存,不小心放在了-20度,还能用吗?
一般情况拿出来放4度,没有析出的情况下是可以使用的,但是有的试剂写着切记放-20度,这种情况下是不能使用的。 所以建议客户收到产品后先详细的看一下说明书。
如何选择比色皿或者96孔板?
波长小于380nm的为紫外光区,需要用石英比色皿或者96孔UV板检测;波长大于380nm的为可见光区,不论石英或者玻璃比色 皿、96孔板均可检测。但若最终测定的反应液为有机试剂时(乙醚、丙酮、乙酰乙酯、四氢呋喃、甲苯、氯仿等有机试剂), 避免使用聚苯乙烯材质的96孔板。
测定时间段的试剂盒的注意事项?
(1)测定时间短:建议使用比色皿或者96孔板一个一个进行测量,加完所有试剂后快速混匀(使用微量比色皿一定要将枪头 插至比色皿底部进行混匀操作)进行测量,如测定多个样本可以在加完最后一个试剂后开始计时,混匀固定时间(10s、20s)再进行测量 (2)测定时间长(10min、30min):微量法可以使用96孔板进行测量,可以使用排枪加入同样的试剂。测定的每一列样本可以错开时间 进行测量以保证数据的准确性,防止一次测量过多样本使起始反应时间不同而导致数据不准确。
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