常见细胞裂解液及其组分

2021/6/1 13:32:52  作者:中华试剂网


 在许多细胞内蛋白表达、纯化及蛋白-蛋白互作等免疫实验(如WB、IP、Co-IP、ChIP)中,细胞裂解是关键一步。

根据不同细胞类型、蛋白定位及下游应用,需要不同的细胞裂解液进行细胞裂解及蛋白提取(表1)。

  • 表1 根据不同蛋白定位选择裂解液
  • 蛋白定位 裂解液
    全细胞 NP-40、RIPA
    细胞质(可溶性蛋白) Tris-HCl
    细胞质(细胞骨架等不溶性蛋白) Tris-Triton
    细胞膜 NP-40、RIPA
    细胞核 RIPA
    线粒体 RIPA
    RIPA裂解液

    RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液,获得的蛋白样品可用于常规WB、IP等实验。

    组分:25 mM Tris-HCl, pH 7.6、150 mM NaCl、1% NP-40、1%去氧胆酸钠、0.1%十二烷基硫酸钠(SDS)。

    IP裂解液

    IP裂解液是一种改良后的RIPA裂解液,具中等强度效力,可高效溶解细胞蛋白,但不会像RIPA一样释放染色体组DNA或破坏蛋白复合物。适合下游免疫沉淀或亲和吸附应用。

    组分:25 mM Tris-HCl, pH 7.4、150 mM NaCl、1% NP-40、1% mM EDTA、5% 甘油。

    NP-40裂解液

    NP-40裂解液是一种很温和的非离子型去垢剂,与蛋白结合力强,尤其适用于膜蛋白非变性条件下的溶解。

    组分:50mM Tris-HCl pH 8.0、150mM氯化钠、1%NP-40;加蛋白酶抑制剂:抑肽酶、亮肽素、胃抑素,每种1μg / ml;使用前立即添加1mM PMSF。

    Tris-Triton裂解液

    Tris-Triton裂解液是非离子型表面活性剂,效力介于NP-40和SDS之间,下游应用有WB、ELISA、IP。

    组分:10mM 三羟甲基氨基甲烷(Tris),pH值7.4、100mM NaCl、1mM EDTA、1mM EGTA、1% Triton X-100、10% 甘油、0.1% SDS、0.5% 去氧胆酸钠。

    • 相关产品
    • 品名 CAS 货号
      Sodium chloride, 99.5%, reagent grade
      氯化钠,试剂级
      7647-14-5 105864
      4-Nonylphenyl-polyethylene glycol (NP-40)
      4-壬基苯基-聚乙二醇
      9016-45-9 931454
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      Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride (Tris HCl), 99%, for bio
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      1185-53-1 165488
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      十二烷基硫酸钠,用于生物化学
      151-21-3 105893
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      三(羟甲基)氨基甲烷,特纯
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      乙二胺四乙酸,试剂级
      60-00-4 932641
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      乙二醇-双(2-氨基乙基醚)-N,N,N’,N’-四乙酸
      67-42-5 136111
      Glycerol, 99%, for bio
      甘油,用于生化
      56-81-5 921371
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