七种粗糙链孢霉培养基
(1)基本培养基
柠檬酸·2H2O(Na3C6H5O7·2H2O) 3.0g
KH2PO4 5.0g
NH4NO3 2.0g
MgSO4·7H2O 0.2g
CaCl2·2H2O 0.1g
微量元素溶液(见(3)) 1.0ml
生物素溶液(10mg/ml) 1.0ml
蔗糖 20.0g
琼脂 15.0g
加蒸馏水至1000ml
(2)杂交培养基
KNO3 1.0g
KH2PO4 1.0g
MgSO4·7H2O 0.5g
NaCl 0.1g
CaCl2·2H2O 0.1g
微量元素溶液(见(3)) 1.0ml
生物素溶液(10mg/ml) 1.0ml
蔗糖 20.0g
琼脂 15.0g
加蒸馏水至1000ml
(3)微量元素溶液(基本培养基和杂交培养基用)
柠檬酸·H2O 500mg
ZnSO4·7H2O 500mg
Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O 100mg
CuSO4·5H2O 25mg
MnSO4·4H2O 5mg
H3BO3 5mg
Na2MoO4·2H2O 5mg
加蒸馏水至100ml
(4)补充培养基
在基本培养基上补一种或多种生长物质,如氨基酸、核酸碱基、维生素等。氨基酸用量一般是100ml基本培养基中加5~10mg。
本实验所用补充培养基只要在基本培养基中适量的赖氨酸,赖氨酸缺陷型菌株就能生长。
(5)完全培养基
基本培养基 1000ml
酵母膏 5g
麦芽汁(亦可省) 5g
酶解酪素 1g
维生素混合液
硫胺素 100mg
核黄素 5mg
吡哆醇 5mg
泛酸钙 50mg
对-氨基苯甲酸 5mg
菸酰胺 5mg
胆碱 100mg
肌醇 100mg
叶酸 1mg
蒸馏水 1000ml
蔗糖 20g
(为获大量分生孢子,可用1%的甘油代替蔗糖)。
加2%琼脂,即为固体完全培养基。
(6)马铃薯培养基
将马铃薯洗净去皮,切碎,取200g,加水1000ml,煮热,然后纱布过滤,弃去残渣,滤下的汁加2%琼脂,20g蔗糖,煮融,分装到试管中。亦可将马铃薯切成黄豆大小碎块,每支试管放4~5块,再加入融入化好的琼脂,蔗糖。
上述培养基分装试管后,55.2kPa(8磅)灭菌30分钟,取出摆成斜面,可代替完全培养基使用。
(7)玉米杂交培养基
将玉米浸泡软化,破碎,每管3~4粒,加入少量琼脂(0.1g左右),加棉塞消毒,即成,不需碎面。