异硫氰酸胍提取其它成分方法

2021/3/5 11:48:32  作者:郭敏


 以提取RNA为例,由于细胞内大部分RNA是以核蛋白复合体的形式存在,所以在提取RNA的时候要利用高浓度的蛋白质变性剂,迅速破坏细胞结构,使核蛋白与RNA分离,释放出RNA。再通过酚,氯仿等有机溶剂处理,离心,使RNA与其他细胞组分分离,得到纯化的总RNA。

在提取的过程中要抑制内源和外源的RNase活性,保护RNA分子不被降解,因此用到没有RNA酶活性的异硫氰酸胍。
提取缓冲液中一般含有SDS,酚,氯仿,胍盐等蛋白质变性剂,也能抑制RNase活性。并有助于除去非核酸成分。
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