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UHPLC–MS级溶剂实用指南

2025/12/4 15:56:23  作者:阿拉丁


 

“适用于UHPLC-MS(for UHPLC-MS)”是什么意思

这些溶剂/试剂是专为配合质谱(MS)检测的超高效液相色谱(UHPLC;< 2µm填料、高压力)而生产并通过相应QC测试的。其具有极低的非挥发残留、ppb级金属杂质、极低的UV/MS本底以及亚微米级微粒控制,因此即使在痕量水平也能保持色谱柱和离子源的清洁与灵敏。

随着LC色谱柱粒径缩小(< 2µm)且系统压力升高(UHPLC系统可运行至约1,000 bar(≈15,000psi)),溶剂洁净度与颗粒控制的重要性显著提升;与此同时,MS离子源对低离子/有机污染的要求愈发严格。各供应商据此推出了面向LC-MS且与UHPLC兼容的专用等级,并在纯化、质量控制(QC)和包装环节增加了工序。由于没有统一的外部标准,“LC-MS/UHPLC-MS等级”由供应商自行界定——请务必查阅批次COA(分析证书)。

UHPLC–MS工作流程对污染极其敏感。微量的非挥发残留、碱金属(Na/K)、增塑剂或微粒都可能抑制电离、提高化学噪声、产生加合物,甚至堵塞滤片/色谱柱(frits/columns)。标注“适用于UHPLC–MS”的产品通过以下措施针对性降低这些风险:(a)更严格的杂质限度,(b)亚微米级末端过滤/洁净包装,以及(c)与方法相关的适用性测试(梯度PDA〔二极管阵列〕、LC–MS本底)。

“适用于UHPLC–MS”相较普通等级的独特之处:

  • 双重调校:同时满足:(1)UHPLC的机械要求(小粒径/高压力)与 (2) MS的化学要求(有利电离、超低离子/有机本底)。
  • 结果收益:更高的灵敏度、更洁净的谱图、更长的色谱柱/离子源寿命,以及在痕量水平下更佳的基线重现性。

在COA上常见的QC/实验室测试项目

具体限度因供应商与溶剂而异,但常见测试包括:

  • MS本底(ESI±)——TIC(总离子流)/背景离子低→痕量水平谱图更干净
  • 痕量金属(ICP-MS)——ppb级Na/K/过渡金属→更少加合物、更高灵敏度
  • 蒸发残留——mg/L级低残留→降低离子源结垢
  • UV/梯度基线(200–400nm)——PDA基线平滑→确保UHPLC梯度稳定
  • 水分(KF)、含量(assay)、酸度/碱度——组成控制
  • 微粒与末端过滤(0.1–0.2µm——保护< 2µm色谱柱
  • 包装/内衬——低析出瓶盖、惰性气体覆盖。

阿拉丁具体产品示例

  • 乙腈(Acetonitrile)——适用于UHPLC,适合MS:低黏度、低背压;已进行MS本底筛查;末端亚微米过滤。小分子ESI方法的优选默认溶剂。
  • 甲酸铵(Ammonium formate)——适用于LC–MS:适用于正/负两种离子模式的挥发性缓冲盐。
  • 氨水(Ammonia solution,25%水溶液)——适用于LC–MS:负离子模式/高pH方法用的挥发性碱;注意色谱柱pH限度与材料相容性。
  • 水(Water)——适用于UHPLC,适合MS:低TIC;< 0.2µm过滤;通过梯度测试。稳定MS基线的关键组成。
  • 甲醇(Methanol)——适用于UHPLC,适合MS:与ACN选择性不同;严格微粒控制。适用于酚类化合物及部分ESI工作流。

与相关等级的比较

等级

主要目的

典型新增测试/特性

适用场景

HPLC grade

低UV/荧光本底,通用色谱

UV截止/透过率,低残留

采用UV/FLD的HPLC(无MS);日常/常规工作

HPLC Gradient grade / UHPLC (UV)

在梯度与小粒径色谱柱上获得平滑基线

梯度基线测试;精细过滤

使用光学检测器的快速梯度HPLC/UHPLC

LC-MS grade

面向质谱的灵敏度与洁净度

MS本底测试;ppb级金属;低残留

在标准HPLC或UHPLC上进行LC-MS(/MS)

UHPLC-MS grade

同时满足UHPLC的机械需求与MS的化学需求

在LC-MS测试基础上,增加更严的颗粒/梯度规范与UHPLC适用性

< 2µm柱 + MS检测的最佳选择

 

选型要点与注意事项

1. 检测器决定等级:若终端检测为MS,请选择LC-MS或UHPLC-MS等级。HPLC级可用于仅UV的方法,但在MS上可能提高噪声或产生加合物。

2. 使用挥发性添加剂:优选甲酸/乙酸甲酸铵/乙酸铵;在LC-MS中避免使用磷酸盐/硼酸盐/Tris——它们会抬高本底、抑制信号并污染离子源。

3. 谨慎使用TFATFA在仅UV的工作流程中有助于峰形,但会抑制电喷雾电离(ESI)信号;若MS灵敏度重要,请改用FA(甲酸)或采取缓解策略。

4. 系统整体匹配:LC-MS级水与有机相同等重要;管路、瓶盖与样品瓶应选用低析出规格(配PTFE衬垫)以减少浸出物。。

5. 不要指望“混合提升”:不同等级混合后,洁净度只会等同于最差的那一组分。

6. 储存与操作:保持严密密封,尽量减小头空间,并使用洁净的玻璃流路;自配混合溶剂须0.2 预过滤,必要时脱气。

常见问答(FAQs)

问:我能在普通HPLC上使用UHPLC–MS 等级溶剂吗?

答:可以——该等级向下兼容。这不会损害系统;但若仅做UV检测,你可能为并不需要的性能多付成本。

问:“LC–MS级”在各品牌间是否有统一标准?

答:没有全球统一规范;各供应商会自定合格标准(如金属项目、MS本底、残留限度等)。请以所用批次的COA为准。

问:为何用“MS级”溶剂做UHPLC–UV仍会出现基线起伏/鬼峰?

答:“MS级”更强调电离洁净度;若要获得梯度UV的平滑基线,请确认该批次通过梯度/PDA测试,或改用专门的梯度/UHPLC等级溶剂。

问:做肽类LC–MS 应选哪种酸?

答:优先尝试甲酸(FA)或甲酸铵TFA可改善峰形,但会抑制ESI灵敏度;仅在必要时、并配合缓解策略(如柱后补加/“去抑制”处理)使用。

问:金属杂质真的重要吗?

答:重要——ppb级碱金属/过渡金属会导致加合物并降低灵敏度;请选择具有ppb级ICP-MS金属指标且MS本底干净的批次。

为什么在UHPLC-MS工作中选择阿拉丁

阿拉丁面向UHPLC–MS的溶剂/添加剂除通过MS本底与ppb级金属的QC外,还完成梯度/UHPLC适用性核验。配套的批次COA与帮助中心指引,方便按方法选择合适等级,并对合规或已验证的流程形成完备的文档化佐证。

 

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