什么是“用于UHPLC级（for UHPLC Grade）”

“UHPLC级”（Ultra-High-Performance Liquid Chromatography grade，超高效液相色谱级）指专为在超高压力、配合亚2µm（或表面多孔颗粒，SPP）色谱柱运行的UHPLC系统而定级的溶剂与流动相添加剂。与常规HPLC级相比，UHPLC级更强调极低微粒含量、极低非挥发残留、超低紫外（UV）背景，以及（通常）低痕量金属——以保护小粒径色谱柱，并在高灵敏度下获得干净、稳定的基线。供应商规格通常包括更严格的终滤孔径（通常0.1–0.2 µm；部分UHPLC系列标称0.1 µm）、更严的UV吸收/梯度适用性，以及额外的LC/UV/MS适用性测试。

UHPLC级的出现，源于可在亚2 µm颗粒上、以>15,000psi运行的UHPLC/UPLC仪器的商品化——这极大提升了速度与分辨率，但对微粒或UV活性杂质几乎零容忍。目前并无统一全球标准；各制造商会自定其对“UHPLC”（及相关 LC/MS）溶剂的规格与测试项目（“HPLC梯度级”同样是供应商定义）。在实际应用中，可信赖的供应商会列出终滤孔径、UV/荧光限值、蒸干残留（RAE）、金属（ICP-MS）以及仪器适用性测试等信息。Waters以UPLC®作为商标进行推广；如今多数实验室采用通用术语“UHPLC”。UPLC® 为Waters公司的注册商标。

UHPLC对系统提出更严苛的要求（更高压力、更窄峰形、更快梯度）。这意味着：

• 在小粒径填料 + 高压力条件下，系统极易被微粒污染/堵塞——因此颗粒控制至关重要。
• 低波长UV与MS检测对溶剂洁净度要求极高，为避免基线起伏、鬼峰/假峰以及离子源噪声，供应商通常会对每批产品在200–400nm范围进行扫描并评估质谱背景。

UHPLC 级的核心特性与亮点

• 更严终滤：通常0.1–0.2µm（而LC/MS级常见为0.2µm），可减少泵密封件磨损/柱堵塞并降低基线噪声。
• 更低非挥发残留：按供应商公开规格计，部分高规格批次的RAE可低至≤1–5ppm（以COA为准），有助于保护色谱柱与离子源。
• ​​高UV透过/梯度适用性：对每个批次在200–400nm进行筛查，确保陡峭梯度下基线平稳（PDA，光电二极管阵列检测器）。
• ​​低痕量金属（见于许多LC/MS/UHPLC产品线）：通过ICP-MS限值降低加合物/离子抑制。
• ​​以应用为导向的定标：供应商开展UV、荧光、CAD（电荷气溶胶检测）与LC-MS适用性测试，以验证低噪声与最小伪影。
• ​​批间一致性 → 梯度与保留时间更可预测。

在COA上常见的QC项目

1. 过滤/颗粒规格：如≤0.1 µm或≤0.2 µm的终滤孔径；有时还提供颗粒计数。

2. UV吸收与“梯度适用性”：在200–400nm范围内进行PDA扫描，并给出接受曲线/限度。

3. 荧光背景：采用与常用荧光检测器设置相匹配的激发/发射（ex/em）波长组合，评估溶剂的本底荧光水平。

4. 蒸干残留（RAE）/非挥发残留。

5. 痕量金属（ICP-MS）：适用于面向LC-MS的系列。

6. 鉴别/含量（例如ACN/MeOH采用GC）；水分（有机溶剂使用KF）。

7. 酸度/碱度（滴定）或pH（适用于水相产品）。

典型应用领域

• 小分子杂质特征分析（在ICH Q3A/B指南框架下），采用PDA/CAD/MS检测。
• ​​生物分析与药代动力学（PK）（UHPLC-MS/MS）。
• ​​肽/蛋白映射、代谢组学与脂质组学——对低噪声、窄峰形有要求。
• ​​高通量质量控制（QC）方法——强调速度与溶剂节省。

阿拉丁产品示例

• UHPLC级水（含0.1%(v/v)氢氧化铵W477275）——适用于反相（RP）HPLC/UHPLC-MS的即用型碱性水相；挥发性碱、低UV背景；终滤0.1–0.2µm。
• 乙腈——提供高纯/梯度级规格；在与亚2µm色谱柱或MS搭配时，选择UHPLC/LC-MS级（详见产品系列页）。
• 甲醇——用于UHPLC/MS工作流，选择 LC-MS级或经UHPLC资格验证的规格，以确保非挥发残留与微粒含量极低。

相关等级——如何比较？

• HPLC级

适用于常规HPLC，检验项目涵盖UV与总体纯度；常见终滤孔径约0.45–0.2µm，可能不包含严格的MS/金属（ICP-MS）指标或0.1µm终滤。适合3–5µm色谱柱。

• LC/MS级

侧重挥发性与质谱洁净度：低金属（ICP-MS）、低质谱噪声；挥发性酸/缓冲盐以“for LC-MS”形式提供。常见终滤为0.2µm；许多系列同样适用于UHPLC-UV。

• UHPLC级（本文）

针对高压力+小粒径优化；通常为0.1µm终滤，并具有严格的UV-梯度适用性；与LC/MS有较大重叠，但更明确面向UHPLC性能。

• UPLC®

Waters公司的UHPLC技术品牌；实际使用中与UHPLC工作流几乎同义。UPLC®为Waters公司的注册商标。

如何选择UHPLC级

1. 使用亚2µm或表面多孔（SPP）色谱柱？为尽量减少堵柱与基线伪影，优先选择UHPLC 级或LC/MS级溶剂。

2. 低波长UV（≤220 nm）或采用PDA的梯度洗脱？优先选用供应商在200–400 nm范围内发布了“梯度适用性”UV扫描的溶剂，可有效降低基线漂移/假峰风险。

3. UHPLC-MS？使用LC/MS级或经UHPLC-MS资格验证的溶剂，并搭配挥发性添加剂（甲酸、甲酸铵/乙酸铵）；避免非挥发性盐与会抑制电离的离子对试剂。

4. 若痕量分析至关重要：请检查RAE与金属指标；RAE目标控制在低ppm区间，并采用较低的ICP-MS金属限度（以COA为准）。

5. 降低操作污染：低可萃取物瓶 + PTFE 内衬盖；非必要勿重复过滤；按需脱气（优先在线真空，超声可，氦鼓泡可选）。

6. 批次资格确认：每次更换批号，先以同一方法跑空白梯度，对比基线漂移/噪声。

常见问答

Q1.在UHPLC系统上能用HPLC级溶剂吗？

有时能“跑起来”，但较高的颗粒负荷/UV背景可能引发压力尖峰、基线漂移或缩短色谱柱寿命。若要尝试，务必使用在线0.2µm过滤并先做预验证；用于受监管/痕量分析时，建议使用UHPLC/LC-MS级。

Q2.UHPLC级与LC/MS级是一样的吗？

二者有重叠但并不相同。LC/MS级更强调质谱洁净度与低金属；UHPLC级更强调超低微粒/低UV基线以适应高压光学系统——不少高规格产品线可同时满足两者。请以各产品说明书/COA为准。

Q3.UHPLC级溶剂还需要再过滤吗？

通常出厂即用（终滤0.1–0.2µm）。额外过滤可能引入污染；仅在开瓶/分装或加入固体后再过滤。若必须再过滤：有机相使用0.1–0.2µmPTFE或PVDF，水相使用PES。由于潜在可萃取物，LC-MS关键工作中避免使用尼龙滤膜。

Q4.添加剂怎么选（TFA、甲酸、铵盐）？

选用标注为LC/MS/UHPLC的挥发性添加剂；此类添加剂已针对低UV/MS背景与低金属杂质完成适用性定标。用于MS检测时应尽量避免TFA（三氟乙酸），因其会抑制电离；优先选择甲酸/乙酸，或甲酸铵/乙酸铵。如确需使用TFA，请将浓度控制在尽可能低（例如≤0.02%），并预期灵敏度下降可能性。

Q5.UHPLC溶剂应如何储存？

保持密闭、避光避热；使用洁净的PTFE内衬瓶盖，并将玻璃器皿/管路专用化以减少可浸出物——每次启用新瓶/新批次后，先跑一次空白梯度快速复核基线。

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