缓冲液参考中心

2022/12/19 15:48:24  作者:阿拉丁生化


 缓冲液参考中心

  • 常见生物缓冲液的pH范围

  • Tris缓冲液的制备 - pH vs. 温度

  • 磷酸盐缓冲液的制备 - 0.2M溶液

  • 柠檬酸 - 磷酸氢二钠缓冲液的配置,pH2.6 - 7.6

  • 柠檬酸 - 柠檬酸钠缓冲液的配置,pH3.0 - 6.2

  • 乙酸钠 - 醋酸缓冲液的配置,pH3.7 - 5.6

  • 磷酸氢二钠 - 磷酸二氢钠缓冲液的配置,pH5.8 - 8.0 (25℃)

  • 咪唑 - 盐酸盐缓冲液的配置,pH6.2 - 7.8 (25℃)

  • 碳酸钠 - 碳酸氢钠缓冲液的配置,pH6.2 - 7.8 (25℃)

  • 缓冲液配置公式

 

选择正确的缓冲液

基于酸碱性、解离常数(衡量溶液酸碱性、浓度以及温度的系数)、规格、纯度以及精确的应用领域可帮助您选择一款合适的缓冲液。以下表格通过pH与pKa数据的参考,为您提供一些常用缓冲液的配置方案。

 

缓冲液级别

为满足各种形式的实验需求,我们提供不同纯度与杂质含量的缓冲液试剂。目前有7种不同级别的试剂可以满足基本的实验室需求、帮助建立药品配方与生产、检测痕量金属含量以及生产指定纯度级别的材料。

 

常用生物缓冲的有效pH范围(25℃, 0.1M)

 

名称 有效的pH缓冲范围 pKa(20℃) pKa(25℃) pKa(37℃) 试剂级 更优级别
MES 5.5-6.7 6.16 6.1 5.97 M105074 M274288
Bis-Tris 5.8-7.2 n/a 6.5 6.36 B105639 B113072
ADA 6.0-7.2 6.65 6.59 6.46 A108964 A108965
ACES 6.1-7.5 6.88 6.78 6.54 A100327 A100328
PIPES 6.1-7.5 6.8 6.76 6.66 P105090 P105092
P105093 P105091
MOPSO 6.2-7.6 n/a 6.9 6.75 M113008 n/a
Bis-Tris-Propane 6.3-9.5 n/a 6.8,9.0 n/a B299299 n/a
B105640
BES 6.4-7.8 7.17 7.09 6.9 B105116 B105117
B105115
MOPS 6.5-7.9 7.28 7.2 7.02 M105135 M274252
M105133
TES 6.8-9.2 7.5 7.4 7.16 T105113 T105114
HEPES 6.8-8.2 7.55 7.48 7.31 H109407 H109408
H109406
DIPSO 7.0-8.2 n/a 7.6 7.35 B113022 n/a
MOBS 6.9-8.3 n/a 7.6 n/a M120630 n/a
TAPSO 7.0-8.2 n/a 7.6 7.39 T113029 n/a
Tris 7.0-9.0 8.2 8.06 7.72 T110600 T110602
T110599
T110598
T274227
T274250
T110601
HEPPSO 7.1-8.5 n/a 7.8 6.66 H113003 n/a
POPSO 7.2-8.5 n/a 7.8 7.63 P105272 n/a
TEA 7.3-8.3 n/a 7.8 n/a T108151 n/a
T108154
EPPS 7.3-8.7 n/a 8 n/a H110899 H110901
H110900
Tricine 7.4-8.8 8.16 8.05 7.8 T100351 T118067
T100350
Gly-gGly 7.5-8.9 n/a 8.2 n/a G105429 G119491
G119492
G119491
Bicine 7.6-9.0 8.35 8.26 8.04 B110905 B110906
HEPBS 7.6-9.0 n/a 8.3 n/a H113002 n/a
TAPS 7.7-9.1 8.49 8.4 8.18 T108961 T108963
T108962
AMPD 7.8-9.7 n/a 8.8 n/a A106026 n/a
TABS 8.2-9.6 n/a 8.9 n/a T329718 n/a
AMPSO 8.3-9.7 n/a 9 9.1 A120640 n/a
CHES 8.6-10.0 9.55 9.49 9.36 C110897 n/a
C110898
CAPSO 8.9-10.3 n/a 9.6 9.43 C105213 n/a
AMP 9.0-10.5 n/a 9.7 n/a A140833 n/a
A100592
CAPS 9.7-11.1 10.56 10.4 10.02 C105209 n/a
C105210
CABS 10.0-11.4 n/a 10.7 n/a C120628 n/a

 

TRIS缓冲液配置指导 - pH vs.温度

 

pH 在不同温度下的变化     g/L  0.5M溶液  
5℃ 25℃ 37℃ Tris-HCl Tris base
7.76 7.2 6.91 7.02 0.67
7.89 7.3 7.02 6.85 0.8
7.97 7.4 7.12 6.61 0.97
8.07 7.5 7.22 6.35 1.18
8.18 7.6 7.3 6.06 1.39
8.26 7.7 7.4 5.72 1.66
8.37 7.8 7.52 5.32 1.97
8.48 7.9 7.62 4.88 2.3
8.58 8 7.71 4.44 2.65
8.68 8.1 7.8 4.02 2.97
8.78 8.2 7.91 3.54 3.34
8.88 8.3 8.01 3.07 3.7
8.98 8.4 8.1 2.64 4.03
9.09 8.5 8.22 2.21 4.36
9.18 8.6 8.31 1.83 4.65
9.28 8.7 8.42 1.5 4.9
9.36 8.8 8.51 1.23 5.13
9.47 8.9 8.62 0.96 5.32
9.56 9 8.7 0.76 5.47

 

磷酸盐缓冲液配置指导 - 0.2M 溶液

 

磷酸二氢钾无水物 g/L 磷酸氢二钠七水合物 23℃ pH 磷酸二氢钾无水物 g/L 磷酸氢二钠七水合物 23℃ pH
22.4 3.49 5.7 10.8 29.51 6.9
22.08 4.29 5.8 9.36 32.73 7
21.6 5.37 5.9 7.92 35.95 7.1
21.05 6.6 6 6.72 38.63 7.2
20.4 8.05 6.1 5.52 41.31 7.3
19.56 9.93 6.2 4.56 43.46 7.4
18.6 12.07 6.3 3.84 45.07 7.5
17.64 14.22 6.4 3.12 46.68 7.6
16.44 16.9 6.5 2.52 48.55 7.7
15 20.12 6.6 2.04 49.09 7.8
13.56 23.34 6.7 1.68 49.89 7.9
12.24 26.29 6.8 1.27 50.81 8

 

醋酸-磷酸氢二钠缓冲液配置,pH 2.6-7.6

一水柠檬酸,C6H8O7 • H2O,MW 210.14;0.1M 含量为21.01 g/L。磷酸氢二钠,MW 141.98; 0.2M 含量为28.40 g/L,或者磷酸氢二钠二水合物,MW 178.05;0.2M 含量为35.61 g/L。

 

当X mL 0.1M-醋酸 和Y mL 0.2M-磷酸氢二钠混合时

 

pH X mL 0.1M-醋酸 Y mL 0.2M-碳酸氢二钠
2.6 89.1 10.9
2.8 84.15 15.85
3 79.45 20.55
3.2 75.3 24.7
3.4 71.5 28.5
3.6 67.8 32.2
3.8 64.5 35.5
4 61.45 38.55
4.2 58.6 41.4
4.4 55.9 44.1
4.6 53.25 46.75
4.8 50.7 49.3
5 48.5 51.5
5.2 46.4 53.6
5.4 44.25 55.75
5.6 42 58
5.8 39.55 60.45
6 36.85 63.15
6.2 33.9 66.1
6.4 30.75 69.25
6.6 27.25 72.75
6.8 22.75 77.25
7 17.65 82.35
7.2 13.05 86.95
7.4 9.15 90.85
7.6 6.35 93.65

 

醋酸-柠檬酸钠缓冲液配置,PH 3.0-6.2

一水柠檬酸,C6H8O7 • H2O,MW 210.14;0.1M 含量为21.01 g/L。柠檬酸三钠二水合物,C6H5O7Na3•2H2O,MW 294.12;0.1M 含量为29.41 g/L。 

 

当X mL 0.1M-醋酸 和Y mL 0.1M-柠檬酸三钠混合时

 

pH X mL 0.1M-醋酸 Y mL 0.1M-柠檬酸三钠
3 82 18
3.2 77.5 22.5
3.4 73 27
3.6 68.5 31.5
3.8 63.5 36.5
4 59 41
4.2 54 46
4.4 49.5 50.5
4.6 44.5 55.5
4.8 40 60
5 35 65
5.2 30.5 69.5
5.4 25.5 74.5
5.6 21 79
5.8 16 84
6 11.5 88.5
6.2 8 92

 

醋酸钠-醋酸缓冲液配置,PH 3.7 - 5.6

醋酸钠,CH3COONa • 3H2O,MW 136.09;0.2M 含量为27.22 g/L。

 

X mL 0.2M-NaOAc Y mL 0.2M-HOAc 混合时

 

 

 

pH,18℃ X mL 0.2M-醋酸钠 Y mL 0.2M-冰醋酸
3.7 10 90
3.8 12 88
4 18 82
4.2 26.5 73.5
4.4 37 63
4.6 49 51
4.8 59 41
5 70 30
5.2 79 21
5.4 86 14
5.6 91 9

 

碳酸氢二钠-碳酸二氢钠缓冲液配置,PH 5.8-8.0  25℃

Na2HPO4 • 2H2O, MW 178.05;0.2M 含量为35.61 g/L。Na2HPO4 • 12H2O,MW 358.22; 0.2M 含量为71.64 g/L。NaH2PO4 • H2O,MW 138.01;0.2M 含量为27.6 g/L。NaH2PO4 • 2H2O,MW 156.03;0.2M 含量为31.21 g/L。 

 

X mL 0.2M-磷酸氢二钠,Y mL 0.2M-磷酸二氢钠;用水稀释至100mL

 

pH,25℃ X mL 0.2M-磷酸氢二钠 Y mL 0.2M-磷酸二氢钠
5.8 4 46
6 6.15 43.85
6.2 9.25 40.75
6.4 13.25 36.75
6.6 18.75 31.25
6.8 24.5 25.5
7 30.5 19.5
7.2 36 14
7.4 40.5 9.5
7.6 43.5 6.5
7.8 45.75 4.25
8 47.35 2.65

 

咪唑-HCl 缓冲液配置,PH 6.2 - 7.8  25℃

咪唑,C3H4N2,MW 68.08

 

25mL 0.2M-咪唑(13.62 g/L),X mL 0.2M-HCl,用水稀释至100mL

 

pH, 25℃ X mL 0.2M-HCl
6.2 21.45
6.4 19.9
6.6 17.75
6.8 15.2
7 12.15
7.2 9.3
7.4 6.8
7.6 4.65
7.8 3

 

碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液配置,PH 9.2 -10.8

Na2CO3 • 10H2O,MW 286.2;0.1M 含量为28.62 g/L。NaHCO3, MW 84.0;0.1M 含量为8.40 g/L。

 

X mL 0.1M-碳酸钠和Y mL 0.1M-碳酸氢钠混合时

 

20℃ 37℃
X mL 0.1M-碳酸钠 Y mL 0.1M-碳酸氢钠
9.2 8.8
9.4 9.1
9.5 9.4
9.8 9.5
9.9 9.7
10.1 9.9
10.3 10.1
10.5 10.3
10.8 10.6

 

缓冲液制备的配方与方式

质量分数(w/v)

(缓冲液所需百分比/100)× 最终缓冲液体积(mL)=  最初所需原料的质量(g)

 

配置摩尔浓度

所需的物质的量浓度 × 分子量 × 溶液最终体积(L) = 所需的质量(g)

 

亨德森-哈塞尔巴尔赫方程

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